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Thermo 正相色谱柱使用和维护说明

日期:2024-03-29 06:01
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摘要:正相色谱柱使用和维护方法说明
1 、  适用键合相
正相色谱柱键合相包括:Amino、Silica、Cyano 等。
2 、  柱体积
色谱柱的柱体积可以通过以下公式估算:
V 为色谱柱柱体积(mL),r 为色谱柱内径(cm),L 为色谱柱长度(cm)。
3 、  色谱柱柱效测试与保存
反相色谱柱出厂时都经过柱效测试,所用化合物为甲苯、邻-硝基苯胺、对-硝基苯胺、
间-硝基苯胺和硝基苯,如有不同,以柱效报告为准。
在条件允许情况下,请对新色谱柱进行柱效测试。
正相色谱柱出厂时均保存在正辛烷-乙醇溶液中(如有不同,以柱效报告上列明为准)。
4 、  温度
所有硅胶基质色谱柱使用温度应低于 60℃。
5 、  样品
* 好将样品溶解在流动相或极性相近的溶剂中。如果使用梯度洗脱,则需要将样品溶解
在初始流动相或极性相近的溶剂中。
样品溶液不应含有任何颗粒物,* 好使用 0.5μm 或更小粒径的滤膜过滤。同时建议在
色谱系统中使用在线过滤器。
样品溶液如果使用强溶剂(例如,流动相为正己烷,样品溶剂为乙醇),为达到较好峰
形,需要降低进样量(以 250x4.6mm 规格为例,小于 10μL)。
6 、  流动相
正相色谱所用溶剂通常为氯仿、正己烷、乙腈、甲醇、乙醇等。严禁使用与色谱柱保存
溶液不互溶的溶剂作为流动相。
对于某些特殊的应用(例如亲水相互作用色谱),要使用与色谱柱保存溶剂不互溶的溶
剂(例如水)作为流动相时,须使用 20 倍柱体积的异丙醇冲洗色谱柱后,方可使用流动相
进行平衡。
所有流动相,* 好当日实验当日配制,并使用 2μm 滤膜过滤。
7 、  色谱柱安装
请小心操作色谱柱。
不要摔、碰色谱柱,这样会损坏色谱柱床,使色谱柱性能下降。
使用合适的连接管路和接头,确保色谱柱连接处死体积降到* 低(使用不锈钢接头时需
要尤其注意)。我们建议使用 SLIPFREE  接头,此接头与 Thermo 色谱柱以及其他品牌色谱
柱均完 美匹配。
8 、  色谱柱平衡
在进行分析之前,请使用至少 20 倍柱体积的流动相冲洗色谱柱,以使色谱柱达到平衡。
Version 2
若需使用与色谱柱保存溶液不互溶的溶剂作为流动相,请在平衡前使用至少 20 倍柱体
积的异丙醇冲洗色谱柱。
9 、  色谱柱保护
对于“脏”的样品以及组分未知的样品,请尽量使用在线滤器或保护柱,如果可能,使
用 SPE 小柱对样品进行前处理是更好的选择。上述做法可以有效延长色谱柱使用寿命。
10 、  色谱柱 清洗
常规清洗:
在储存色谱柱之前,请用强的溶剂冲洗色谱柱(去除强保留成分,正相色谱柱中通常使
用乙醇),然后使用合适的溶剂储存色谱柱。
清洗强保留污染物:
如果色谱柱柱效出现大幅下降,且柱效下降可能由于强保留物质聚积所导致时,使用如
下试剂依次清洗色谱柱
20 倍柱体积正己烷;
20 倍柱体积异丙醇;
20 倍柱体积乙腈;
20 倍柱体积水;
20 倍柱体积乙腈;
20 倍柱体积异丙醇;
20 倍柱体积正己烷。
11 、  色谱柱保存
正相相色谱柱,保存溶剂通常是含乙醇的正己烷,也可在常规清洗后直接保存在乙醇中。
如果需要长时间储藏,则需要注意色谱柱密封,避免保存溶液挥发。
注意:如果违反上述规程,可能使色谱柱失去保修。